Гидроксильным числом (
) называют количество калия гидроксида, выраженное в миллиграммах, эквивалентное суммарному количеству кислоты, присутствующей в растворе после ацилирования 1 г испытуемого вещества.
Гидроксильное число характеризует число гидроксильных групп в веществе.
Гидроксильное число может быть определено одним из трех методов.
Если не указано иначе в фармакопейной статье, точную навеску испытуемого вещества, указанную в табл. 1, помещают в колбу вместимостью 150 мл, снабженную обратным холодильником. Прибавляют 25% раствор уксусного ангидрида в безводном пиридине в количестве, указанном в табл. 1. Нагревают колбу на водяной бане в течение 1 ч, поддерживая уровень воды в бане на 2,5 см выше уровня жидкости в колбе. Вынимают колбу из бани и оставляют охлаждаться. Прибавляют 5 мл воды через верхний конец холодильника. При появлении помутнения прибавляют пиридин до образования прозрачного раствора, отмечая прибавленный объем. Колбу встряхивают и снова помещают на водяную баню на 10 мин. Вынимают колбу из бани и оставляют охлаждаться. Промывают холодильник и стенки колбы 5 мл спирта 96%, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину. Содержимое колбы титруют калия гидроксида раствором спиртовым 0,5 М, используя 0,2 мл фенолфталеина раствора 1% в качестве индикатора. Проводят контрольный опыт в тех же условиях.
| Ожидаемое гидроксильное число | Навеска испытуемого вещества, г | Объем ацилирующего агента, мл |
| 10 - 100 | 2,0 | 5,0 |
| 100 - 150 | 1,5 | 5,0 |
| 150 - 200 | 1,0 | 5,0 |
| 200 - 250 | 0,75 | 5,0 |
| 250 - 300 | 0,60 или 1,20 | 5,0 или 10,0 |
| 300 - 350 | 1,0 | 10,0 |
| 350 - 700 | 0,75 | 15,0 |
| 700 - 950 | 0,5 | 15.0 |
Гидроксильное число вычисляют по формуле:
,
(1)
где 
- объем калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
- объем калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, израсходованный в контрольном опыте, мл;
- кислотное число;
а - навеска испытуемого вещества, г;
28,5 - количество калия гидроксида, содержащееся в 1 мл калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, мг.
Точную навеску испытуемого вещества, указанную в фармакопейной статье, помещают в сухую коническую колбу вместимостью 5 мл с притертой пробкой и прибавляют 2,0 мл пропионового ангидрида реактива. Колбу закрывают, встряхивают до полного растворения испытуемого вещества и оставляют на 2 ч. Затем содержимое колбы переносят в коническую колбу вместимостью 500 мл, содержащую 25,0 мл анилина раствора 0,9% в циклогексане и 30 мл уксусной кислоты ледяной. Содержимое колбы перемешивают круговым движением и оставляют на 5 мин. Прибавляют 0,05 мл кристаллического фиолетового раствора 0,5% и титруют хлорной кислоты раствором 0,1 М до появления изумрудно-зеленой окраски. Проводят контрольный опыт в тех же условиях.
Гидроксильное число вычисляют по формуле:
,
(2)
где - объем хлорной кислоты раствора 0,1 М, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
- объем хлорной кислоты раствора 0,1 М, израсходованный в контрольном опыте, мл;
а - навеска испытуемого вещества, г;
5,610 - количество калия гидроксида, соответствующее 1 мл хлорной кислоты раствора 0,1 М, мг.
Полученное значение гидроксильного числа пересчитывают с поправкой на содержание воды по формуле:
,
(3)
где W - содержание воды в испытуемом веществе, %.
Точную навеску испытуемого вещества, указанную в табл. 2, помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл с притертой пробкой и прибавляют 5 мл смеси свежеперегнанных пиридина и уксусного ангидрида (3:1). Присоединяют обратный холодильник и нагревают колбу на кипящей водяной бане в течение 1 ч, прибавляют 10 мл воды через холодильник и нагревают еще 10 мин. Охлаждают и прибавляют 25 мл бутанола, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину калия гидроксида спиртовым раствором 0,5 М - сначала через холодильник прибавляют 15 мл, затем холодильник удаляют и промывают стенки колбы 10 мл бутанола. Прибавляют 1 мл фенолфталеина раствора 1% и титруют калия гидроксида раствором спиртовым 0,5 М. Проводят контрольный опыт в тех же условиях.
Определение свободных кислот. Около 10,0 г (точная навеска) испытуемого вещества помещают в коническую колбу вместимостью 125 мл, прибавляют 10 мл свежеперегнанного пиридина, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину, прибавляют 1 мл фенолфталеина раствора 1% и титруют калия гидроксида раствором спиртовым 0,5 М. Гидроксильное число ( ) вычисляют по формуле:
,
(4)
где 
и 
- навески вещества, взятые для ацилирования и для определения свободных кислот соответственно, г;
V - объем калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, израсходованный на титрование в основном опыте после ацилирования, мл;
- объем калия гидроксида спиртового раствора 0,5 М, израсходованный на титрование в контрольном опыте при ацилироваиии, мл;
- объем калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, израсходованный при титровании свободных кислот, мл;
28,5 - количество калия гидроксида, содержащееся в 1 мл калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, мг.
| Ожидаемое гидроксильное число | Навеска испытуемого вещества, г |
| Менее 20 | 10 |
| 20 - 50 | 5 |
| 50 - 100 | 3 |
| 100 - 150 | 2 |
| 150 - 200 | 1,5 |
| 200 - 250 | 1,25 |
| 250 - 300 | 1,0 |
| 300 - 350 | 0,75 |
При анализе окрашенных масел конечную точку титрования устанавливают потенциометрически.