|
| М. м. 244,20 |
Содержит не менее 98,5% и не более 101,5% рибавирина 
в пересчете на сухое вещество.
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. Проявляет полиморфизм.
Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, мало или очень мало растворим в метиленхлориде.
Подлинность
1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области частот от 4000 до 400 
по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца рибавирина.
2. Тонкослойная хроматография
Испытуемый раствор. 0,01 г субстанции помещают пробирку, растворяют в 1 мл воды и перемешивают.
Раствор стандартного образца рибавирина. 0,01 г стандартного образца рибавирина помещают в пробирку, растворяют в 1 мл воды и перемешивают.
Раствор анисового альдегида. 5 мл анисового альдегида смешивают с 90 мл спирта 96%, 5 мл серной кислоты концентрированной и 1 мл уксусной кислоты ледяной.
На линию старта пластинки Силикагель 60 наносят по 0,01 мл испытуемого раствора (100 мкг рибавирина) и раствора стандартного образца рибавирина (100 мкг). Пластинку с нанесенными пробами сушат в токе воздуха в течение 10 мин, помещают в камеру со смесью 0,1 М раствор аммония хлорида - ацетонитрил (2:9) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат в токе воздуха в течение 15 мин, опрыскивают раствором анисового альдегида, затем сушат при температуре 110°С в течение 30 мин и просматривают.
Пятно на хроматограмме испытуемого раствора по положению, окраске и величине должно соответствовать пятну на хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина.
Удельное вращение. От -33° до -37° в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции, ОФС "Поляриметрия"). Измерение проводят в течение 10 мин после приготовления раствора.
* Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").
* Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен быть бесцветным (ОФС "Степень окраски жидкостей").
рН. От 4,0 до 6,5 (2% раствор. ОФС "Ионометрия", метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.
Раствор А. 0,1% раствор трифторуксусной кислоты. 1 г трифторуксусной кислоты помешают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм и дегазируют.
Раствор В. 450 мл раствора А смешивают с 50 мл метанола и дегазируют.
Испытуемый раствор. Около 0,02 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл раствора А, доводят объем раствора раствором А до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Раствор сравнения. 1,0 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, доводят объем раствора раствором А до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром нор 0,45 мкм.
Раствор для проверки пригодности хроматографический системы.
5 мг стандартного образца рибавирина и 5 мг гуанозина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 25 мл раствора A, доводят объем раствора раствором А до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Хроматографические условия
| Колонка | 150 мм х 3 мм с октадецилсиланом (С 18), 3,5 мкм; |
| Подвижная фаза (ПФ) | ПФ А: 0,1% раствор трифторуксусной кислоты; ПФ В: смесь раствора А и метанола (90:10); |
| Температура колонки | 30°С; |
| Скорость потока | 0,4 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 210 нм: |
| Объем пробы | 20 мкл. |
Градиентное элюирование
| Время, мин | ПФ А, % | ПФ В, % | Элюирование |
| 0-5 | 90 | 10 | Изократическое |
| 5-15 | 100 | Линейный градиент | |
| 17 | 100 | Изократическое | |
| 19 | 90 | 10 | Линейный градиент |
| 35 | 90 | 10 | Изократическое, уравновешивание колонки |
Колонку уравновешивают смесью ПФ А и В (90:10) до достижения стабильной базовой линии. Вводят и анализируют последовательно раствор для проверки пригодности хроматографический системы, испытуемый раствор, раствор сравнения, раствор А. Пики раствора А на хроматограмме испытуемого раствора не учитывают.
На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (R) между пиками рибавирина и гуанозина должно быть не менее 10; относительное стандартное отклонение площадей пиков рибавирина и гуанозина должно быть не более 2,0%.
На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика каждой единичной примеси должна быть не более половины площади пика на хроматограмме раствора сравнения (0,25%). Сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более удвоенной площади пика рибавирина на хроматограмме раствора сравнения (1,0%).
Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжёлые металлы" в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС "Сульфатная зола").
Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".
Бактериальные эндотоксины. Не более 0,15 БЭ на 1 мг рибавирина (ОФС "Бактериальные эндотоксины").
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".
Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях определения родственных примесей.
Испытуемый раствор. 10,0 мл испытуемого раствора (см. раздел "Родственные примеси") помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора раствором А до метки, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Раствор стандартного образца рибавирина. Около 0,02 г (точная навеска) стандартного образца рибавирина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворе А, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. 10,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора раствором А до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Раствор используют свежеприготовленным.
Режим элюирования - изократический, подвижная фаза - смесь растворов А и В (90:10).
Содержание рибавирина в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
где S - площадь пика рибавирина на хроматограмме испытуемого раствора 1;
- площадь пика рибавирина на хроматограмме стандартного образца рибавирина;
а - навеска субстанции, г;
- навеска стандартного образца рибавирина, г;
Р - содержание рибавирина в стандартном образце, %.
Хранение. В плотно укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.
______________________________
* Контроль по показателям качества "Прозрачность раствора", "Цветность раствора" и "Бактериальные эндотоксины" проводят в субстанциях, предназначенных для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.